随着基因检测、疾病诊断等分子生物学的发展,传统的核酸提取方法如酚-氯仿法、盐析法、滤膜离心柱法等的提取效果已无法满足发展的需求。
磁珠法核酸提取方法因其可实现批量操作、自动化提取、用时短等优点,得到越来越广泛的应用。 磁珠法核酸提取的操作步骤主要包括:(1)裂解;(2)结合;(3)洗涤;(4)分离四大部分。具体为细胞或组织在裂解液作用下将DNA/RNA释放出来,经过表面修饰的超顺磁性氧化硅纳米磁珠与所释放出的DNA/RNA进行特异性结合,形成核酸-磁珠复合物,后续在核酸-磁珠复合物中加入洗涤液,洗去非特异性吸附的蛋白质等杂质,去除杂质的核酸—磁珠复合物在磁场条件下分离富集磁珠,最后得到欲提取的核酸物质。
磁珠法核酸提取的优势
磁珠法DNA提取是纳米科技与生物技术的结合,具有其它DNA提取方法不可比拟的优势:
(1)样本需求量低:微量的材料即可提到高浓度的核酸;
(2)操作简单快速:整个操作流程基本分为五步(裂解、结合、洗涤、干燥、洗脱),全程无需离心操作,大多可在30~60分钟内完成;
(3)质量稳定可靠:游离的磁珠与核酸的结合量更大,特异性的结合使得核酸纯度更高,且可通过控制磁珠表面基团来调节核酸回收量;
(4)全自动化操作:采用核酸提取仪可实现自动化、高通量操作,一键启动,即可实现几十甚至几百个样品的提取;
(5)安全无毒无害:试剂不含酚、氯仿等有毒化学试剂,*符合现代化环保理念。